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发布时间: 2017 - 07 - 18
Drop Maker 样本制备仪采用光、机、电一体化设计,配套具有自主知识产权的微流控芯片,可以将水相样本快速制备成纳升体积的液滴。液滴数与样本体积相关,30微升样本可制备约5万个液滴。液滴尺寸均一,并可在PCR扩增后保持稳定。产品说明起始样本量(μL)20-50制备通量1-8个样本制备时间4min / 8样本每 30 μL 样本液滴数约50000个仪器尺寸(宽 ´ 深 ´ 高)38 x 34 x 35 cm
发布时间: 2017 - 07 - 18
Chip Reader 生物芯片阅读仪采用光、机、电一体化设计,及激光共聚焦原理,配套有自主知识产权的微流控芯片,可以准确快速地定位、识别纳升体积微液滴,获取其荧光信号值。经过泊松统计分析,提供研究者所需的阳性、阴性液滴数绝对数值,从而推算出起始靶标核酸分子的精确浓度。Chip Reader  生物芯片阅读仪兼容Taqman水解探针和EVAGreen检测。产品说明阅读通道FAM(EvaGreen)、VIC(HEX)阅读通量1-8个样本阅读时间20min / 8样本仪器尺寸(宽 ´ 深 ´ 高)45 x 47 x 49 cm
发布时间: 2018 - 03 - 11
ddPCR 通用扩增试剂专门针对微液滴数字PCR扩增体系特点而开发,采用了特异修饰的热启动DNA聚合酶,配合精心优化的稳定剂,使微液滴更稳定,扩增效率更高,重复性更好。经过优化使荧光信号的释放达到最佳效果,使扩增信号更强,检测更灵敏。适用于采用探针法或染料法对DNA进行数字PCR定量检测,适用于新羿数字PCR系统和其他数字PCR系统。产品为预混试剂形式,反应液配制时,只需加入DNA模板、引物、探针、灭菌蒸馏水便可进行ddPCR反应,操作简单方便。可对单分子DNA模板进行准确定量检测。一步法probe RT-ddPCR试剂盒一步法probe RT-ddPCR试剂盒采用了高效逆转录酶,以及特异修饰的热启动DNA聚合酶,配合精心优化的缓冲体系,可以通过逆转录和微液滴数字PCR高效、特异、灵敏地定量检测RNA靶分子,适用于探针法对RNA进行一步法快速、灵敏的数字PCR检测。具有定量准确,扩增效率高,重复性好的特点。产品为预混试剂形式,反应液配制时,将缓冲液、酶混合,并加入RNA模板、引物、探针、灭菌蒸馏水便可进行RT-ddPCR反应,操作简单方便,可对单分子RNA模板进行准确检测。
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数字PCR和微液滴技术

日期: 2017-07-18
浏览次数: 1522

数字PCR

 数字PCR即digital PCR(dPCR),它是一种核酸分子绝对定量技术。数字PCR与传统定量PCR(qPCR)技术不同,数字 PCR 采用绝对定量的方式,不依赖于标准曲线和参照样本,直接检测目标序列的拷贝数,检测极限可达单拷贝,具有比传统 qPCR 更加出色的灵敏度、特异性和精确性。


 ddPCR(droplet digital PCR)是基于微液滴平台的数字PCR技术,拥有比其他数字PCR技术更高的分辨率和检测灵敏度。


 ddPCR工作原理是:首先通过微液滴生成仪将含待测样品均分到大量直径为微米级的“油包水”微液滴中,体积为皮升级,数量为十万到百万级。由于微液滴数量足够多,微液滴之间被油层相互隔离,因此每个微液滴相当于一个“微型PCR孔”,微液滴中只含有待测样品的单分子DNA;针对这些单分子DNA在每个微液滴中进行PCR扩增反应,完成荧光标记和信号放大。通过微液滴分析仪对每个微液滴荧光信号进行检测,有荧光信号的微滴判读为1,意味着有一个初始DNA分子,没有荧光信号的微滴判读为0,意味着没有初始DNA分子。根据泊松分布原理实现对核酸样本的绝对定量。 

数字PCR

ddPCR技术在痕量核酸样本检测、复杂背景下稀有突变检测和表达量微小差异鉴定方面具有极大的优势,从而可以使癌症的液体活检、无创产前筛查、感染性疾病的早期检测等重大医学挑战更加容易实现。


微液滴技术

  微液滴技术以其高灵敏度、高准确性、高通量、全封闭、全集成、自动化的优势正成为业界新的革命性技术。微液滴技术的领导者是美国哈佛大学David Weitz教授(美国科学院、美国工程院、美国艺术与科学院,三院院士)。该技术通过微液滴芯片手段,生成直径为微米级的微液滴,以包裹单分子或单细胞,进行生化反应与检测。其独特的优势有如下五点:

1) 灵敏度高,一个液滴可包含单个分子或细胞,在物理层面实现单分子级检测;

2) 绝对定量,逐个计数,从而实现生物检测界梦寐以求的数字化绝对定量;

3)准确性强,每次微流体芯片可生成数百万个微液滴,同样一个反应在多个微液滴中同时进行,相当于一次实验中对某个检测进行了多次重复,对逐个微液滴统计分析,结果可靠;

4)防污染,生化反应局限于惰性油包裹的水相中,通过芯片设计可达到全封闭,不会对实验室环境和下次反应造成污染,进而保证结果的可靠;

5)全集成,微液滴的生成、反应、检测都是在流体中,易于集成和自动化。

数字PCR和微液滴技术

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