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发布时间: 2018 - 10 - 26
人EGFR基因突变检测试剂盒用于体外定性检测非小细胞肺癌患者的血浆样本或组织样本游离DNA中EGFR基因突变,也可用于辅助筛选可用EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKI)进行治疗的非小细胞肺癌(NSCLC)患者,同时可对肺癌患者进行高灵敏度早期复发监测,及用药期间耐药性突变监测,具有如下特点:· 可检测EGFR基因主要突变位点,包括18外显子G719X突变、19外显子缺失突变(19del)、21外显子L858R突变、L861Q、20外显子T790M突变、S768I突变及插入突变(20ins)等多种基因型。· 试剂盒中含有UNG酶+dUTP防污染体系。· 可以检测血液、石蜡包埋组织(FFPE)及冷冻新鲜组织中提取的DNA。· 提供突变状态的定性和定量评估。· 反应液配制时,只需加入Master Mix、水和模板便可进行ddPCR实验,操作简单方便。· 检测灵敏度可达0.1%或更低,可对单分子模板进行准确定量检测。
发布时间: 2017 - 08 - 14
数字PCR耗材分为微液滴样本制备通用试剂盒(包含微液滴生成芯片、微液滴生成油、微液滴生成芯片密封垫、8联排管及8联排管盖),以及微液滴检测通用试剂盒(包含微液滴检测芯片、微液滴检测油及微液滴检测芯片密封垫),用于配套Drop Maker 样本制备仪,将水相溶液样本制备为纳升体积液滴,并通过Chip Reader 生物芯片阅读仪对微液滴进行定量检测。产品说明起始样本量(μL)20-50芯片通量8个样本池(可单独使用)
发布时间: 2018 - 03 - 11
微液滴生成油及微液滴检测油采用了专利技术合成的高分子表面活性剂为活性成分,专为微液滴生成检测系统而设计。使用微液滴生成油可在不同条件下生成大小均一、形态稳定的数十微米直径微液滴,使用微液滴检测油可保持微液滴在其流动检测过程中形态稳定、减小流阻及背景荧光的影响。精制氟化油为微液滴生成油及检测油的专用溶剂,性能稳定,生物相容性极佳。
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数字PCR  数字PCR即digital PCR(dPCR),它是一种核酸分子绝对定量技术。数字PCR与传统定量 PCR(qPCR)技术不同,数字 PCR 采用绝对定量的方式,不依赖于标准曲线和参照样本,直接检测目标序列的拷贝数,检测极限可达单拷贝,具有比传统 qPCR 更加出色的灵敏度、特异性和精确性。 ddPCR(droplet digital PCR)是基于微液滴平台的数字PCR技术,拥有比其他数字PCR技术更高的分辨率和检测灵敏度。 ddPCR工作原理是:首先通过微液滴生成仪将含待测样品均分到大量直径为微米级的“油包水”微液滴中,体积为皮升级,数量为十万到百万级。由于微液滴数量足够多,微液滴之间被油层相互隔离,因此每个微液滴相当于一个“微型PCR孔”,微液滴中只含有待测样品的单分子DNA;针对这些单分子DNA在每个微液滴中进行PCR扩增反应,完成荧光标记和信号放大。通过微液滴分析仪对每个微液滴荧光信号进行检测,有荧光信号的微滴判读为1,意味着有一个初始DNA分子,没有荧光信号的微滴判读为0,意味着没有初始DNA分子。根据泊松分布原理实现对核酸样本的绝对定量。 ddPCR技术在痕量核酸样本检测、复杂背景下稀有突变检测和表达量微小差异鉴定方面具有极大的优势,从而可以使癌症的液体活检、无创产前筛查、感染性疾病的早期检测等重大医学挑战更加容易实现。微液滴技术  微液滴技术以其高灵敏度、高准确性、高通量、全封闭、全集成、自动化的优势正成为业界新的革命性技术。微液滴技术的领导者是美国哈佛大学David Weitz教授(美国科学院、美国工程院、美国艺术与科学院,三院院士)。该技术通过微液滴芯片手段,生成直径为微米级的微液滴,以包裹单分子或单细胞,进行生化反应与检测。其独特的优势有如下五点:1) 灵敏度高,一个液滴可包含单个分子或细...
发布时间: 2017 - 07 - 18
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数字PCR(digital PCR,dPCR)技术也称为第三代PCR技术,是一种新的核酸检测和定量方法。与传统定量 PCR(qPCR)技术不同,数字 PCR 采用绝对定量的方式,不依赖于标准曲线和参照样本,直接检测目标序列的拷贝数,检测极限可达单拷贝,具有比传统 qPCR 更加出色的灵敏度、特异性和精确性。数字PCR技术在痕量核酸样本检测、复杂背景下稀有突变检测和表达量微小差异鉴定方面具有极大的优势。
发布时间: 2017 - 08 - 15
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数字PCR  数字PCR即digital PCR(dPCR),它是一种核酸分子绝对定量技术。数字PCR与传统定量 PCR(qPCR)技术不同,数字 PCR 采用绝对定量的方式,不依赖于标准曲线和参照样本,直接检测目标序列的拷贝数,检测极限可达单拷贝,具有比传统 qPCR 更加出色的灵敏度、特异性和精确性。 ddPCR(droplet digital PCR)是基于微液滴平台的数字PCR技术,拥有比其他数字PCR技术更高的分辨率和检测灵敏度。 ddPCR工作原理是:首先通过微液滴生成仪将含待测样品均分到大量直径为微米级的“油包水”微液滴中,体积为皮升级,数量为十万到百万级。由于微液滴数量足够多,微液滴之间被油层相互隔离,因此每个微液滴相当于一个“微型PCR孔”,微液滴中只含有待测样品的单分子DNA;针对这些单分子DNA在每个微液滴中进行PCR扩增反应,完成荧光标记和信号放大。通过微液滴分析仪对每个微液滴荧光信号进行检测,有荧光信号的微滴判读为1,意味着有一个初始DNA分子,没有荧光信号的微滴判读为0,意味着没有初始DNA分子。根据泊松分布原理实现对核酸样本的绝对定量。 ddPCR技术在痕量核酸样本检测、复杂背景下稀有突变检测和表达量微小差异鉴定方面具有极大的优势,从而可以使癌症的液体活检、无创产前筛查、感染性疾病的早期检测等重大医学挑战更加容易...
发布时间: 2017 - 07 - 18
浏览次数:1223
数字PCR在移植排斥监控中的应用 器官移植是治疗器官衰竭的最佳方法之一,对于末期器官病变患者更是唯一有效的治疗方式。常见移植器官包括心脏、肺脏、肝脏、肾脏、胰脏和小肠。据统计,2017年我国实施器官移植手术超过1.6万例,随着公民逝世后自愿捐献例数不断增加,器官移植手术量呈逐年上升趋势,移植手术的质量也大幅提升。然而,移植排斥反应仍然是这一领域的一大难题,是导致移植手术失败的重要原因。器官移植后,由于供、受者之间的组织抗原不同,移植物刺激受者的免疫系统发生免疫应答,引发排斥反应。树突状细胞(DC)在免疫应答过程中提呈抗原,激活受体T细胞,T细胞对同种异体移植物识别并活化,介导免疫应答,通过多种机制破坏、杀伤移植物(图一)。图一:移植排斥反应机制(来源:Ayala-García MA, et al. (2012) “The Major Histocompatibility Complex in Transplantation”. Journal of transplantation.)虽然免疫抑制剂的使用可以避免排斥反应的发生从而增加移植物的存活率,但是它们大多具有一些副作用,应尽可能减少其用量。因此,术后监控,特别是对移植排斥的监控,对于器官移植受者的长期存活至关重要。通过监测患者的术后状态,可以为其设计个性化的治疗方案,从而避免过多的使用免疫抑制剂,...
发布时间: 2018 - 11 - 23
浏览次数:94
数字PCR在靶向测序建库中的应用二代测序技术,也称为高通量测序技术,一次可对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定。靶向捕获测序技术是二代测序技术衍生出来的一个重要分支,只对感兴趣的目标基因进行扩增测序,能够更高效经济地测定DNA序列。靶向捕获建库是测序流程中的重要环节,目前具有代表性的方法是罗氏Nimblegen序列捕获芯片、安捷伦Sureselect基于液相靶向捕获系统和基于多重PCR扩增的基因捕获系统1。目前常用的靶向文库制备方法多样,但在捕获均一性、中靶效率、操作流程、检测成本等方面需要改进。基于PCR扩增引物设计的灵活性及简单的操作流程,多家公司开发了多重PCR扩增的捕获体系。多重PCR扩增体系通过多对引物对基因组进行扩增捕获,但随着引物增加时,扩增引物之间或引物与微量扩增模板之间的相互作用会降低扩增效率。微液滴数字PCR作为一种新兴的检测技术,通过数以万计的微液滴将扩增模板分散到不同微液滴中,降低引物对模板的竞争作用,实现对微量模板如循环肿瘤DNA等有效扩增,获得更高的捕获效率(如下图所示)。Tewhey2最早将微液滴数字PCR平台应用于靶向捕获测序中,该研究先制备包含不同扩增引物和打断基因组DNA的微液滴库,然后将两种不同液滴按照1:1比例融合,PCR扩增后完成捕获(如下图所示)。该方法通过微液滴将不同引物进行分隔,避免了引物之间的竞争作用,提高了目标序列捕获的特异性...
发布时间: 2018 - 11 - 23
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数字PCR在肿瘤液体活检中的应用  肿瘤是全球重大疾病。如何更早的发现肿瘤、更有针对性的治疗,是有效控制肿瘤和提高生存率的两大难题。   组织活检在肿瘤的诊治中扮演重要作用,但存在许多局限性:第一,并非所有的肿瘤病人都能通过手术获得病灶;第二,组织活检给患者带来很大痛苦,也不能频繁取样,依从性差;第三,肿瘤组织存在异质性,即病灶的不同部位存在差异,不能准确反映肿瘤情况。   新兴的肿瘤液体活检,即采用循环肿瘤DNA(ctDNA)为检测对象能很好的解决上述难点。ctDNA采用外周血采样,是无创或微创的,可以提高肿瘤病人依从性并多次采样;ctDNA能准确反映肿瘤的整体情况,克服异质性。   ctDNA是凋亡的肿瘤细胞上脱落的基因片断,是传递肿瘤信息的密码,是优秀的肿瘤标志物,可用于肿瘤发展、治疗和预后评价。ctDNA的检测研究集中于数字PCR和超高通量测序两大技术平台,其中数字PCR具有更高的灵敏度和更低的成本,在肿瘤液体活检和临床应用中将扮演领导地位。新羿EGFR肺癌液体活检试剂利用液滴数字PCR技术进行突变位点的检测,具有如下特点:· 检测EGFR多位点突变。· 适用于血液、组织等。· 操作简便,体系防污染。· 检测灵敏度达0.1%。...
发布时间: 2018 - 11 - 28
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数字PCR在无创产前筛查中的应用  随着二胎政策放开,出现了更多的高龄孕妇。如何精确、简便、快速地对孕妇,尤其是高龄孕妇进行产前检测,是每个家庭都关心的大事。我国新生儿出生缺陷率为5.6%,如何控制出生缺陷,是摆在我国相关政府部门的一道难题。  血清学筛查和超声等产前检测方法虽然已经普及,但灵敏度和准确性欠佳。羊水穿刺是传统产前诊断技术,但孕妇不乐意接受,原因是对胎儿和孕妇都有相当程度的危险。  安全、准确的无创产前检测技术(non-invasive prenatal testing,NIPT)是利国利民的大事。NIPT是建立在孕妇外周血中存在着胎儿游离DNA这一科学发现上的,其核心是针对孕妇外周血中的痕量胎儿游离DNA进行扩增以及精确定量分析。  目前NIPT主要采用的技术路线为高通量全基因组测序。数字PCR技术具有成本低、自动化程度高、操作简单、出报告快等优点,将进一步有力推动NIPT的普筛。
发布时间: 2018 - 11 - 28
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