知识中心  
推荐产品 /   
发布时间: 2017 - 07 - 18
Drop Maker 样本制备仪采用光、机、电一体化设计,配套具有自主知识产权的微流控芯片,可以将水相样本快速制备成纳升体积的液滴。液滴数与样本体积相关,30微升样本可制备约5万个液滴。液滴尺寸均一,并可在PCR扩增后保持稳定。产品说明起始样本量(μL)20-50制备通量1-8个样本制备时间4min / 8样本每 30 μL 样本液滴数约50000个仪器尺寸(宽 ´ 深 ´ 高)38 x 34 x 35 cm
发布时间: 2017 - 07 - 18
Chip Reader 生物芯片分析仪采用光、机、电一体化设计,及激光共聚焦原理,配套有自主知识产权的微流控芯片,可以准确快速地定位、识别纳升体积微液滴,获取其荧光信号值。经过泊松统计分析,提供研究者所需的阳性、阴性液滴数绝对数值,从而推算出起始靶标核酸分子的精确浓度。Chip Reader  生物芯片分析仪兼容Taqman水解探针和EVAGreen检测。产品说明阅读通道FAM(EvaGreen)、VIC(HEX)阅读通量1-8个样本阅读时间20min / 8样本仪器尺寸(宽 ´ 深 ´ 高)45 x 47 x 49 cm
发布时间: 2020 - 03 - 13
该试剂盒采用创新的RNA一步法逆转录数字PCR技术,可对样本中的2019-nCoV进行高灵敏与准确定量检测。参考国家CDC和WHO的指南,针对2019-nCoV的多个区域进行检测,增加检测的特异性并减少漏检错检。试剂盒内设有内参基因,可对采样、提取和PCR扩增等步骤进行质控,确保检测过程的精准可靠。该试剂盒目前已经在多家新型冠状病毒治疗重点医院或国家重点实验室开展临床评价,目前的评估数据显示有非常优异的性能。
联系我们
电话: 0755-2955 6666
邮箱: eims@qiwang.cn
地址: 中国深圳宝安中心区宝 源路F518时尚创意园15栋3层

“准”共聚焦微液滴数字PCR分析仪,Talanta,2020


发表文献网址: https://doi.org/10.1016/j.talanta.2019.120200


2019年8月1日,清华大学医学院生物医学工程系郭永实验室合作在《Talanta》在线发表题为《一种用于高精准和防污染检测的“准共聚焦”荧光流式微液滴阅读仪》(A 'Quasi' Confocal Droplet Reader Based On Laser-Induced Fluorescence (LIF) Cytometry for Highly-Sensitive and Contamination-Free Detection)的研究论文,该研究创新地采用了“准共聚焦”式检测光路和全封闭的微流控芯片,实现了微液滴数字PCR的高精准和防污染检测。


微液滴数字PCR是一种单分子水平的核酸定量分析技术。其策略是:首先将PCR反应体系分割为大量的微液滴,使得绝大多数微液滴内仅含有0个或1个模板分子(分别称为“阴性微液滴”和“阳性微液滴”);然后经过PCR扩增反应,“阳性微液滴”呈现出较强的荧光信号,而“阴性微液滴”呈现出较弱的背景荧光信号;最后,通过微液滴内荧光的检测和分类,可以得到待测模板的拷贝数。


数字PCR的微液滴直径介于10-100 μm之间,这对传统荧光检测技术提出很高的要求。如果“阳性微液滴”与“阴性微液滴”之间的荧光信号对比度偏低,将引发“阳性微液滴”与“阴性微液滴”区分的困难和错误。与此同时,由于微液滴数字PCR具有超高的灵敏性,在PCR反应后的任何开放式操作都可能造成微液滴内容物的挥发和逸出,导致扩增产物的气溶胶污染。目前商业化微液滴数字PCR仪器多涉及PCR反应后的开放式操作,比如微液滴的吸取和转移等,这在临床应用中可能导致样本假阳性的严重后果。


为了解决上述不足,在这项研究中,研究人员采用了“准共聚焦”式荧光流式来构建微液滴阅读仪的光路(图1),其激发光路采用了新型的离焦激发模式,使得激发光斑恰好与微液滴的尺寸相匹配,最大限度地激发整个微液滴内的荧光信号,提高“阳性微液滴”与“阴性微液滴”之间的信号对比度;其荧光检测光路使用与微流道共轭的小孔来消除微流道以外的杂散光,提高荧光信号的信噪比。基于上述光路,研究人员实现了10-10,000模板拷贝的微液滴数字PCR高灵敏度检测,其相对误差小于5%,线性度r²>0.998。

准共聚焦dPCR阅读仪,Talanta,2019

图1:微液滴阅读仪采用的“准共聚焦”荧光流式光路

与此同时,研究人员设计了新型的微流控芯片(图2),该芯片采用了一种“密封-穿刺”的结构,使用适配器(Adaptor)在管盖(Rubber cap)外侧形成更大范围的密封,使得反应管盖被刺穿时微液滴处于一个更大的密闭空间中,从而在检测过程中保持了严格的密闭,避免微液滴核酸扩增产物气溶胶的污染。基于上述芯片结构,研究人员在连续进行了7天表皮生长因子受体基因(EGFR)T790M突变位点的检测后,将6管未加任何模板的EGFR T790M反应体系暴露于微液滴阅读仪周边15分钟,以充分地吸收可能从微液滴阅读仪中逸出的气溶胶污染。微液滴数字PCR的检测结果显示,所有6管未加模板的EGFR T790M反应体系全部呈阴性结果,证明该微液滴阅读仪可有效避免微液滴数字PCR的污染。

准共聚焦dPCR阅读仪,Talanta,2019

图2:微液滴阅读仪采用的微流控芯片

该研究为微液滴数字PCR的临床应用提供了一种高灵敏和防污染的自动化检测装置。随着精准医疗的发展,开发高灵敏和防污染的单分子核酸检验和定量分析技术对于疾病的筛查、诊断、用药指导、病情监测和预后均具有重要意义。


清华大学医学院的朱修锐博士和刘宝霞博士为该论文的共同第一作者,医学院郭永研究员和精仪系荆高山博士对该研究进行了指导,北京新羿生物科技有限公司参与了合作研究。本课题得到国家自然科学基金和北京新羿生物科技有限公司横向合作课题等的经费资助。


原文链接:

https://doi.org/10.1016/j.talanta.2019.120200

转自:清华大学医学院微信公众号



联系我们
地址:北京市海淀区成府路268号中科科仪大厦5号楼305室
电话:010-82481061
邮箱:info@targetingone.com
 
Copyright ©2017 - 2024 北京新羿生物科技有限公司
犀牛云提供企业云服务